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微量/通用型蛋白质组试剂盒

微量/通用型蛋白质组试剂盒

  • 所属分类:蛋白质组学技术服务
  • 浏览次数:
  • 发布日期:2023-06-13 11:36:32
  • 产品概述
  • 案例解析

Q: 酶解后的肽段经除盐操作后CV值升高,怎么办?

A: MagicOmics-MMB 微量/通用型蛋白质组试剂盒,样品无需肽段富集和除盐,即可直接LC-MS/MS分析,且兼容大部分质谱仪,肽段回收率高达77% 。


产品介绍

原理:

利用亲水性相互作用机制交换或去除用于促进细胞或组织裂解、蛋白质溶解和酶解(例如洗涤剂、试剂、盐、缓冲液、酸和溶剂)的组分,用于快速制备微量蛋白质组学样品,包括还原烷基化和酶切步骤,无需肽段富集和除盐,可直接进行LC-MS/MS分析。

适用样本:

带Loading Buffer的溶液(IP样品/CoIP样品)

微量细胞(103~105)和微量组织(<5µmX5mmx5mm的FFPE

LCM激光显微切割的组织

已知蛋白浓度的蛋白质溶液(0.05-1µg/µL)

体液样本(尿液、脑脊液,肺泡灌洗液等)


产品优势

高肽段回收率更适用于微量、超微量样品,且蛋白质检出率更高

M:Marker

P:10µg 细胞裂解液

S: MMB 磁珠与细胞裂解液孵育后的上清

E1:第1次清洗磁珠的Buffer

E2:第2次清洗磁珠的Buffer

F:直接Loading Buffer洗脱磁珠后蛋白质回收溶液

按照电泳灰度值计算蛋白回收率为:99.9%

image.png

利用MagicOmics-MMB酶切5µg的293T,酶切后的肽段进行nanodrop定量,并计算肽段的回收率,整体肽段的回收率77%以上。

image.png


实验一

分别用了20μL尿液、50ng的293T蛋白质、500个293T细胞、10µMx3MMx3MM FFPE样本、100µg 脑组织样本利用 MagicOmics-MMB 微量/通用型蛋白质组试剂盒配合MagicOmics-AP-96智能机器人进行了微量蛋白质组学测试。

image.png


实验二

同一样品分为9份,在96孔反应板上随机挑选9个孔,MagicOmics-AP-96使用MagicOmics-MMB 微量/通用型蛋白质组试剂盒流程处理后,将样品进行质谱检测。


高色谱重现性

不同孔之间酶切肽段的总离子流色谱图(TIC)基本完全一致。(为便于观看,此图仅展示3个样品)


高鉴定稳定性

9例样品经质谱检测肽段和蛋白鉴定数变异系数低至0.88%和0.56%。


高定量重现性

9例样品经质谱检测蛋白质组数据的定量重现性高(皮尔森相关系数>0.95)




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